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小鼠ELISA試劑盒的實驗原理及操作步驟

更新時間:2022-03-11 點擊量:320
       小鼠ELISA試劑盒用純化的小鼠NLRP3抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入小鼠NLRP3,再與HRP標記的NLRP3抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NLRP3呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠NLRP3濃度。
  小鼠ELISA試劑盒操作步驟:
  1.細胞上清:
  處理前有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時,用規范品稀釋液直接稀釋.
  ?2.腦脊液:
  處理前有必要是細胞離心去除,每孔直接加100μl即可.假如濃度太高需稀釋時,用規范品稀釋液直稀釋.
  3.血清血漿:
  請參加50ul樣本剖析緩沖液后加50ul標本,如稀釋量大,請將樣本與樣本剖析緩沖液等量參加,缺乏部分用規范品稀釋液補充至100ul.
  A.血清標本應是自然凝結后,取上清,防止在冰箱中凝結血液;
  B.血漿標本,引薦用EDTA的方法搜集若待測樣本不能及時檢測,標本搜集后請分裝,凍存于-20℃,防止反復凍融.
  C.血清標本不應添加任何防腐劑或抗凝劑;
  D.標本應清澈通明,檢測前樣本中如有懸浮物應經過離心去除.
  E.請勿運用溶血,高血脂或污染的標本檢測,不然成果將不準確.

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