結合在固相載體表面的抗原或仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。降鈣素ELISA試劑盒在測定時，受檢標本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形襯抗原復合物與中的其他分開。
　　再加入酶標記的抗原或，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定達到很高的度。
　　由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原，使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
　　經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存，對檢測結果即可用肉眼觀察，降鈣素ELISA試劑盒又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發生改變，從而引起被檢測物的顯示，溶液中的抗原物質，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定，對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及應用單位均易購置。