SNP的檢測知識：

    人類基因組中存在著廣泛的多態(tài)性，zui簡單的多態(tài)形式是發(fā)生在基因組中的單個核苷酸的替代，即單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）。SNP通常是一種二等位基因的（biallelic），即二態(tài)的遺傳變異，SNP的數(shù)量大、分布廣，在組成人類基因組的30億個堿基中，平均每000個就有一個SNP。SNP作為第三代遺傳標(biāo)記，在復(fù)雜疾病的基因定位、關(guān)聯(lián)分析、個體疾病易感性分析與藥物基因組學(xué)(pharmacogenomics)的研究中發(fā)揮著愈來愈重要的作用。ELISA試劑盒

.直接測序法進(jìn)行SNP分析

    在所有SNP的檢測方法中，對欲檢測片段進(jìn)行直接擴(kuò)增、測序是zui為準(zhǔn)確的方法。通常情況下，純合型SNP位點(diǎn)的測序峰為單一峰型，而雜合型SNP位點(diǎn)的測序峰為套峰，因而很容易將其區(qū)分開來。通過直接測序方法進(jìn)行SNP檢測的檢出率接近00%。

2. PCR-SSCP方法

    單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（single-strand conformation polymorphism，SSCP）是一種簡單、地檢測DNA或RNA序列中點(diǎn)突變的技術(shù)，由于實(shí)驗(yàn)成本較低，也是一種目前較為常用的方法。

檢測原理：

    單鏈DNA片段呈復(fù)雜的空間折疊構(gòu)象，這種立體結(jié)構(gòu)主要是由其內(nèi)部堿基配對等分子內(nèi)相互作用力來維持的，當(dāng)有一個堿基發(fā)生改變時，會或多或少地影響其空間構(gòu)象，使構(gòu)象發(fā)生改變，空間構(gòu)象有差異的單鏈DNA分子在聚丙烯酰胺凝膠中受排阻大小不同。因此，通過非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)，可以非常敏銳地將構(gòu)象上有差異的分子分離開。ELISA試劑盒

需要注意的問題：

A．PCR-SSCP只能作為一種突變檢測方法，要zui后確定突變的位置和類型，還需進(jìn)一步測序。

B．由于SSCP是依據(jù)點(diǎn)突變引起單鏈DNA分子立體構(gòu)象的改變來實(shí)現(xiàn)電泳分離的，這樣就可能會出現(xiàn)當(dāng)某些位置的點(diǎn)突變對單鏈DNA分子立體構(gòu)象的改變不起作用或作用很小時，再加上其他條件的影響，使聚丙烯酰胺凝膠電泳無法分辨造成漏檢。

C．經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明小于300bp的DNA片段中的單堿基突變，90%可被SSCP發(fā)現(xiàn)。ELISA試劑盒