如何zui大限度地降低組織非特異性染色？

（）縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是zui重要的一條。

（2）一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。

（3）內源性過氧化物酶和在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色；

（4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果；

（5）縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等；

（6）適當增加PBS沖洗次數和浸洗時間，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要；

（7）防止標本染色過程中出現干片，這容易增強非特異性著色。

蘇木素復染時間的把握？

（）蘇木素復染時間要看當時的室溫、溶液的新舊、目標抗原的定位等情況，一般數秒-數分鐘。不過這個如果染色不理想可以補救的。即：染色深則分化時間稍長些即可；染色淺則再置于蘇木素中染色即可。

（2）鹽酸酒精是分化，氨水是返蘭。作用不同。片子復染完后流水振洗，然后置于鹽酸酒精中數秒（一定動作要快）后拿出流水振洗，在放入氨水中返蘭即可。抗體

（3）如果分化的顏色過淺，可以復置于蘇木素中染色。